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基于DNA条形码的桑黄真菌分子鉴定

徐鑫; 边勇; 陈哲; 孙悦; 刘子璐; 胡渤洋; 武扬; 张国庆 北京农学院生物科学与工程学院/农业部都市农业北方重点实验室; 北京102206; 北京出入境检验检疫局检验检疫技术中心; 北京101312; 浙江出入境检验检疫局; 浙江杭州310016
  • 桑黄
  • 分子鉴定
  • dna条形码
  • nl
  • its

摘要:DNA条形码(DNA barcoding)技术是一种利用生物基因组内短遗传标签进行分类鉴定的方法.桑黄自古以来是一种名贵中药材,而市售桑黄主要依托简单的形态鉴定造成混淆众多.近年来大量研究表明,桑黄类真菌种类至少有7个种,并且其药效也不尽相同.【目的】为更准确、高效对桑黄类真菌进行鉴定,本研究以采集自西藏、吉林和浙江的3种桑黄子实体为材料,筛选最佳DNA条形码与相应PCR条件.【方法】利用组织分离获得3种桑黄纯培养菌株,分别编号为1713、1714和HS菌株.利用ITS、NL、rpb1、rpb2和ef1-α等7组DNA条形码分别对3种桑黄进行PCR扩增、测序、比对和发育树分析,并结合形态学特征,确定其最适DNA条形码和分类学地位.【结果】结果表明,ITS和NL条形码对3种桑黄均能够获得单一目的条带;rpb1Y、rpb2B和rpb2Y条形码特异性低,扩增后获得多个条带;而rpb1B和ef1-α条形码均无法获得条带.通过多序列比对,结合形态分析,确定1713菌株为桑黄纤孔菌(Inonotus sanghuang),而1714和HS菌株均为鲍姆纤孔菌(Inonotus baumii).【结论】本研究确定ITS和NL为桑黄分子鉴定的最佳DNA条形码,其PCR最适退火温度范围分别为58~59℃和49~50℃,为桑黄真菌快速鉴定提供参考依据.

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