首页 > 期刊 > 自然科学与工程技术 > 基础科学 > 物理学 > 波谱学 > 拟南芥AtGrp7RRM结构域的纯化及其结构与结合的初步分析(英文) 【正文】
拟南芥AtGrp7RRM结构域的纯化及其结构与结合的初步分析(英文)
大连工业大学生物工程学院; 辽宁大连116034; 洁净能源国家实验室(中国科学院大连化学物理研究所); 辽宁大连116023; 国家艾滋病性病防治中心; 病毒与免疫研究室; 北京102206; 波谱与原子分子物理国家重点实验室、武汉磁共振中心(中国科学院武汉物理与数学研究所); 湖北武汉430071
- 快速稀释
- atgrp7
- 结合分析
摘要：富含甘氨酸的RNA结合蛋白AtGrp7是拟南芥(Arabidopsis thaliana)调节生物钟负反馈回路的组分.在使用常规方法纯化AtGrp7 RRM结构域的初始试验中,观察到烟草蚀纹病毒(TEV)酶切后AtGrp7 RNA识别基序(RRM)结构域的紫外吸收峰为蛋白和杂质的混合信号峰.为解决常规纯化中的杂质问题,对AtGrp71-90应用了变性-复性两步纯化方法.AtGrp7 RRM结构域的1H-15N HSQC指纹谱和CS-Rosetta模型结构表明快速稀释重折叠后其结构完全恢复.等温滴定量热法(ITC)和核磁共振(NMR)滴定实验进一步证实,重折叠后AtGrp71-90 RRM结构域具有正确结合RNA/DNA的功能.
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