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丝腺特异表达hBPI23转基因蚕的制作和表达分析

冉冬旭; 欧瑶; 刘荣鹏; 肖海梅; 徐汉福 家蚕基因组生物学国家重点实验室; 西南大学生物技术学院; 重庆400715
  • 家蚕
  • 转基因
  • 丝腺
  • 表达

摘要:杀菌/通透性增加蛋白(bactericidal/permeability-increasing protein,BPI)最先是在人类中性粒细胞中发现的一种阳离子抗菌蛋白,具有抗革兰氏阴性菌和中和内毒素等作用。研究表明,人BPI蛋白的N末端区(hBPI23,分子量为23kDa)具有天然BPI的全部生物活性。为探索利用BPI提高蚕丝抗菌性能的可行性,本研究首先构建了以家蚕后部丝腺特异启动子fibH为调控元件、hBPI23为靶标的转基因表达载体,进而通过显微注射和荧光筛选,制作获得了携带hBPI23的转基因系H-hBPI23。进一步检测显示:H-hBPI23的基因组整合位点位于家蚕第23号染色体上;在H-hBPI235龄幼虫后部丝腺中,hBPI23的转录表达在整个5龄期呈上升趋势,5龄第6d(吐丝前1d)达到表达高峰,其表达模式与内源丝素蛋白基因类似。本研究为下一步开展H-hBPI23蚕丝的抗菌性能研究打下了初步基础。

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