B群链球菌CAMP阴性株的表型及分子特征初步分析

摘要：目的初步分析B群链球菌(GBS)CAMP因子缺失株的生物学特征以及基因组序列特征。方法首先通过CAMP实验筛选CAMP实验阴性的GBS临床分离株,然后测定并绘制CAMP实验阴性株和阳性株在不同温度、不同pH环境下的生长曲线,再通过与Hep.2、RAW264.7共培养及流式细胞术,比较分析上述菌株在黏附、抗吞噬及吞噬细胞内存活能力、与人白细胞相互作用的差异,同时应用下一代测序技术检测CAMP实验阴性株和阳性株基因组序列,对15个已知的毒力相关基因进行初步比较分析。结果从407株GBS中分离出1株CAMP阴性株,与4株CAMP阳性菌相比,5株菌在不同温度及不同PH环境中的生长无显著差异,CAMP阴性菌对Hep-2的黏附力最强,与RAW264.7作用后吞噬率最高且吞噬细胞内存活能力差。流式细胞分析显示,新鲜人全血中性粒细胞、单核细胞对CAMP阴性株的吞噬率均高于其他4株CAMP阳性菌株。下一代测序技术分析表明CAMP阴性株cfb基因缺失,其他已知毒力相关基因(fbsA、fbsB、scpB、lmb、bca、hylB、cyl、gbcA、neuA、neuB、neuC、neuD、rib、sip)在5株菌中均有检出。结论CAMP因子在GBS的黏附、抗吞噬细胞吞噬及吞噬细胞内存活过程中起作用。