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华支睾吸虫富甘氨酸2a类抗原Cs4重组蛋白的免疫学特性与定位

程娜; 许学年; 张鸿满; 周岩; 谭裕光; 包意芳; 张陆娟; 徐斌; 江河; 黎学铭; 冯正 中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所; 世界卫生组织疟疾、血吸虫病和丝虫病合作中心; 卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室; 上海200025; 广西壮族自治区疾病预防控制中心; 南宁530028
  • 华支睾吸虫
  • 富甘氨酸2a抗原
  • 抗原性
  • 组织定位
  • 分泌蛋白

摘要:目的对华支睾吸虫富甘氨酸2a(glycine rich antigen 2a,GRA2a)类抗原Cs4重组蛋白(rCs4)进行免疫学特性分析,并对GRA2a类抗原进行组织定位。方法使用蛋白质印迹(Western印迹)分析rCs4与华支睾吸虫病患者混合血清的免疫反应性,并分析GRA2a类抗原的分泌性。应用ELISA法检测rCs4免疫小鼠血清中抗rCs4特异性IgG水平,并动态检测华支睾吸虫感染兔0~44周的血清中抗rCs4特异性IgG水平。通过免疫荧光实验(immunofluorescence assay,IFA)对华支睾吸虫GRA2a类抗原进行组织定位。结果纯化的rCs4可被华支睾吸虫病患者混合血清识别。rCs4单抗(mAbCs4—31)与华支睾吸虫排泄分泌抗原和可溶性抗原在相对分子质量(Mr)26000与55000之间分别有13、15个反应条带,均呈阶梯状分布。ELISA检测rCs4免疫小鼠抗rcs4和ESA的IgG效价均达1:64000,感染兔的抗rCs4特异性抗体平均水平自感染第4周开始上升,于第6周达到高峰,此后逐步递减,至第20周已呈较低水平。IFA检测发现GRA2a类抗原定位于华支睾吸虫成虫的表皮。结论Cs4蛋白是华支睾吸虫在感染早期的分泌型蛋白,具较好的抗原性。GRA2a类抗原定位于华支睾吸虫成虫表皮。

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