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越橘低温响应因子VcICE1的克隆和功能鉴定

宋杨; 刘红弟; 王海波; 张红军; 刘凤之 中国农业科学院果树研究所; 农业部园艺作物种质资源利用重点实验室; 辽宁省落叶果树矿质营养与肥料高效利用重点实验室; 辽宁兴城125100
  • 越橘
  • 低温
  • ice1
  • 表达分析
  • 功能鉴定

摘要:为挖掘越橘低温胁迫响应基因在低温逆境胁迫应答中的作用,探讨越橘低温逆境胁迫响应机制,以北陆越橘为试材,克隆低温响应基因 VcICE1 (Inducer of CBF3 expression 1),分析其表达模式及对低温的响应,探讨 VcICE1 在抵御低温胁迫中的生物学功能。利用农杆菌介导法获得转基因拟南芥,比较转基因和野生型拟南芥对低温胁迫响应的差异。利用瞬时转化烟草叶片试验,分析VcICE1对 AtCBF3 的转录调控。结果表明,克隆获得越橘低温响应因子 VcICE1 ,该基因ORF为1 566 bp,编码含有522个氨基酸的蛋白质,含有1个保守的bHLH结构域。系统进化分析表明,VcICE1与AtICE1同源性最高。表达分析显示, VcICE1 在根、枝条、幼叶、花和果实中均表达,在幼叶中表达量最高,在果实中最低,并响应低温处理。在拟南芥中异位表达 VcICE1 ,其低温抗性较野生型显著升高。瞬时表达试验结果表明,VcICE1可激活 AtCBF3 的表达。 VcICE1 能够对低温处理有明显响应,推测其在响应低温胁迫过程中发挥重要的调控作用。

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