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结缕草热激蛋白基因ZjHSP19.5植物表达载体构建及转化

张雅晰; 李鑫; 屈新月; 唐志菲; 魏佳兴; 冯英伟; 孙鑫博 河北农业大学河北省作物生长调控重点实验室; 河北保定071000
  • 结缕草
  • 热激蛋白
  • 表达载体
  • 匍匐翦股颖

摘要:以结缕草(Zoysia japonica Steud)cDNA为模板,利用PCR扩增ZjHSP19.5基因,并插入到PGEM-T Easy Vector上构建成克隆载体ZjHSP19.5-T。利用限制性内切酶BamHI分别对克隆载体ZjHSP19.5-T和植物表达载体PZH01进行单酶切,得到目的基因和线性质粒。在T4DNA连接酶的作用下将两者进行定向连接,经琼脂糖凝胶电泳检测、酶切鉴定,获得植物表达载体P-ZjHSP19.5。利用农杆菌介导法将重组植物表达载体P-ZjHSP19.5转化至匍匐翦股颖,为进一步研究ZjHSP19.5的功能和培育匍匐翦股颖抗热新品系打下基础。

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