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骨髓间充质细胞与多系分化持续应激细胞的蛋白质谱分析比较

赵雅玉; 费颖; 季煜华; 王晓冬; 陈罡 南通大学江苏省神经再生重点实验室; 江苏226001; 南通大学医学院组织学与胚胎学系; 江苏226001
  • 骨髓间充质细胞
  • 多系分化持续应激细胞
  • 蛋白质谱分析

摘要:目的:比较骨髓间充质细胞(hBMSCs)和多系分化持续应激细胞(Muse细胞)蛋白表达的差异。方法:通过密度梯度离心和差速贴壁法从健康人骨髓中分离得到hBMSCs,流式细胞仪检测其中SSEA-3/CD105双阳性细胞;利用长时间胰酶孵育法从hBMSCs中分离得到Muse细胞,利用qPCR技术在mRNA水平检测多能干细胞标记物的表达情况;提取hBMSCs和Muse细胞蛋白,应用iTRAQ标记结合online 2D LC/MS/MS蛋白组学技术定量评估蛋白质表达谱。结果:hBMSCs中SSEA-3和CD105双阳性细胞占0.51%;长时间胰酶孵育法可以成功分离出Muse细胞,悬浮可呈球状生长,且SSEA-3、Sox-2、Oct-4表达均高于hBMSCs;蛋白质谱共检测4 377个蛋白,相对于hBMSCs,Muse细胞有27个上调蛋白和68个下调蛋白。结论:hBMSCs和Muse细胞蛋白表达基本相同,仅有95种蛋白存在差异。

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