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贝氏柯克斯体九里株Ⅱ相突变体的克隆与鉴定

何泽民; 孙志会; 于永慧; 罗声栋; 王益清; 王景林; 姜永强; 宋立华 病原微生物生物安全国家重点实验室; 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所; 北京100071; 解放军总医院第五医学中心临床研究管理中心; 北京100039
  • 贝氏柯克斯体
  • q热
  • 全基因组测序
  • 适应性变异

摘要:目的:克隆分离国内贝氏柯克斯体九里株Ⅱ相突变体,并利用基因组测序方法进行鉴定,为贝氏柯克斯体研究提供参考依据。方法:用半固体平板法克隆分离贝氏柯克斯体,对随机选择的克隆株CB01进行全基因组测序分析,将测序结果与国外贝氏柯克斯体不同克隆株的基因组进行比较分析。结果:CB01的基因组全长2.024Mb,包含1个1.987Mb的环状染色体和1个37.321kb的质粒。与九里株Ⅰ相菌(RSA493克隆)基因组相比,CB01多出5个重复序列,有1个25997bp的删除区,23个单核苷酸多态性位点(SNP)差异。与九里株Ⅱ相菌(RSA439克隆)基因组相比,CB01同样多出5个重复序列,但仅有6个SNP差异。CB01与RSA439的CBU_0533基因序列完全相同,可解释CB01缺失O抗原从而成为Ⅱ相菌。结论:贝氏柯克斯体九里株Ⅱ相菌克隆CB01与国外Ⅱ相菌RSA439高度同源,CB01可用做国内贝氏柯克斯体研究用参考菌株。

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生物技术通讯

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