肉葡萄球菌电转化条件的优化
工业发酵微生物教育部重点实验室; 天津科技大学生物工程学院; 天津300457; 天津科技大学后勤管理处; 天津300457
- 肉葡萄球菌
- 电转化
- 转化效率
摘要：肉葡萄球菌(Staphylococcus carnosus)作为革兰氏阳性菌,遗传转化难度大是限制其遗传操作的主要因素之一.通过优化菌体生长状态、电击缓冲液、复苏培养基组分等条件,分析了各因素对S.carnosusTM300电转化效率的影响.研究表明:S.carnosusTM300在B2生长培养基中生长到A578=0.6时收集菌体,使用GS电击缓冲液洗涤菌体制备感受态细胞,在电压2450V、间距2mm电转杯条件下进行电转化,电击后立即加入LBM复苏培养基,37℃、180r/min摇床复苏培养4h,可以获得的最佳电转化效率为5.95×10^3μg^-1.
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