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作用于种属差异性表位的细菌α-半乳糖苷酶(EmGalase)的鉴定和研究

郭雅萌; 侯琳琳; 沈旦枫; 邹琳; 王蕾; 李天胜; 孙桂芹; 陈力 复旦大学上海医学院基础医学院教育部、卫健委、医科院医学分子病毒学重点实验室; 上海200032; 浙江中医药大学医学技术学院; 杭州310053
  • 酶学性质
  • 脑膜炎败血伊丽莎白金菌
  • 感染

摘要:对脑膜炎败血伊丽莎白金菌进行糖苷酶功能基因组分析发现,该菌存在一个GH27家族α-半乳糖苷酶基因。克隆该基因并表达蛋白后,利用人工合成的pNP底物研究其酶学性质,发现该酶具有α连接的半乳糖(α-galactose,α-Gal)底物特异性,酶反应pH为3.0~8.0,反应温度为4~45 ℃。用不同寡糖底物进一步确定,该酶能够酶切直链末端α-1,3、1,4、1,6Gal。在猪红细胞上进行的酶切实验显示,该酶能够高效清除存在于猪红细胞表面的末端Gal α 1-3Gal表位。末端α-半乳糖基化修饰在免疫与感染中发挥着重要的生物学作用,作用于种属差异性表位的细菌α-半乳糖苷酶的发现将为该领域的研究提供一个新的工具,为缓解异种输血中的超急性免疫排斥反应提供一种可能。

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