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原核与真核生物宿主DNA残留检测方法的建立与比较

周飞燕; 孔雯雯; 符美娟 广州白云山拜迪生物医药有限公司; 广东广州511495
  • 原核生物
  • 真核生物
  • dna残留
  • 杂交

摘要:目的建立原核生物[大肠杆菌(E.coli)]和真核生物(酵母菌和CHO细胞)宿主DNA残留的检测方法,并比较检测方法的灵敏度。方法以E.coli、酵母菌和CHO细胞宿主DNA为模板,制备地高辛标记的探针。将探针与宿主DNA进行杂交后采用底物显色法显色,建立3种生物宿主DNA残留检测方法,并比较温度对检测方法灵敏度的影响。结果建立了E.coli、酵母菌和CHO细胞宿主DNA的检测方法,灵敏度高达10 pg;同一条件下真核生物宿主DNA残留检测方法的灵敏度要高于原核生物。结论该检测方法具有灵敏度高、准确性好、操作简便等优势,可用于E.coli、酵母菌和CHO细胞宿主DNA残留的检测及质量控制。

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