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一种改良的Sprague Dawley新生大鼠视网膜Müller细胞培养方法

杨梅; 范围; 黄瑶; 袁容娣 中国人民解放军陆军军医大学第二附属医院眼科; 重庆400037
  • 细胞培养
  • spraguedawley大鼠
  • 视网膜
  • muller细胞

摘要:目的改良SpragueDawley(SD)新生大鼠视网膜Müller细胞培养方法。方法取新生1~2d的SD,分2d完成视网膜Müller细胞的提取,第1天将眼球浸泡于含体积分数1%双抗的无血清高糖达尔伯克改良伊戈尔培养基(DMEM)中,置于37℃、含体积分数5%CO2的培养箱内过夜;第2天,去培养基,以2.5g·L^-1胰蛋白酶消化眼球1h,分离视网膜组织,加入含体积分数1%双抗和体积分数10%胎牛血清的高糖DMEM培养基,制备细胞悬液接种培养;24h后换液,6~8d后传代,传至第4代,细胞免疫荧光染色法鉴定Müller细胞纯度。结果Müller细胞贴壁生长良好,细胞体宽大,细胞质丰富,细胞核呈圆形或椭圆形,无神经元共生长,Müller细胞纯度>95%。结论改良的SD新生大鼠视网膜Müller细胞培养方法操作简单,细胞纯度高。

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