异丙酚干预下人羊膜间充质干细胞移植对大鼠脑损伤的影响

摘要：目的人羊膜间充质干细胞（AM-MSCs）移植同时予以异丙酚治疗，观察两者对脑损伤大鼠恢复的影响。方法健康SD鼠80只，雌雄各半，体质量300～350g。体外复苏并培养人羊膜间充质干细胞（CM-Dil标记）移植前备用。采用液压颅脑损伤仪，给予液压冲击力，制成重型液压颅脑损伤模型，伤后6h给予相应治疗随机分成4组：损伤组（培养液移植组）、AM-MSCs移植组、异丙酚组、AMMSCs+异丙酚组。利用CM-Dil标记在荧光显微镜下观察各组的阳性细胞数。移植后4周各组随机处死6只，并用RT-PCR、WesternBlot检测脑组织中GAP-43、AQP4基因表达和蛋白合成的变化。移植后24h，3天及1、2、3、4周行动物神经学缺损评分，在移植后4周进行Morris水迷宫（Morris Water Maze,MWM）试验。四周后处死行免疫组化、HE染色。结果CM-Dil的阳性细胞数AM-MSCs+异丙酚组最多，异丙酚组、AM-MSCs移植组次之，损伤组最少，且各组之间差异有显著性意义(P＜0.05)。移植后4周脑损伤周围组织AQP4及其mRNA的表达损伤组高于AM-MSCs移植组、异丙酚组；AM-MSCs移植组、异丙酚组高于AM-MSCs+异丙酚组（P＜0.05）；GAP-43及其mRNA的表达损伤组低于AM-MSCs移植组、异丙酚组，AM-MSCs移植组、异丙酚组低于AM-MSCs+异丙酚组（P＜0.05）。移植后1周，大鼠神经功能障碍评分AM-MSCs+异丙酚组低于异丙酚组、AM-MSCs移植组；异丙酚组、AM-MSCs移植组低于对照组（P＜0.05）。AM-MSCs+异丙酚组穿越平台次数高于异丙酚组、AM-MSCs移植组（P＜0.05），明显高于损伤组（P＜0.01）。观察伤后4周病理切片，损伤组未见神经轴索通过，异丙酚组、AM-MSCs移植组可见少量神经轴索样结构，AM-MSCs+异丙酚组可见较多神经轴索样结构。结论异丙酚联合人羊膜间充质干细胞移植治疗大鼠脑损伤可明显改大鼠的神经学功能。