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旋毛虫Ts-Sp-7蛋白的表达纯化及其多克隆抗体的制备

张胜兰; 刘琰; 李岩松; 刘晓雷; 白雪; 唐斌; 王学林; 刘明远; 周玉 吉林大学动物医学学院/人兽共患病研究教育部重点实验室; 吉林长春130062; 长江大学动物科学学院; 湖北荆州434023
  • 旋毛虫
  • 原核表达
  • 间接免疫荧光

摘要:为给旋毛虫病的诊断及疫苗研制提供备选抗原,对本实验室获得的旋毛虫Ts-Sp-7基因(GenBank登录号EU263332.1)进行PCR扩增,构建原核表达载体,进行表达纯化,Western-blot分析。制备多克隆抗体进行间接免疫荧光分析。通过PCR扩增出1372 bp的Ts-Sp-7基因。SDS-PAGE结果显示,该蛋白大小为46 ku左右,与理论分子质量一致。Western-blot结果显示,该目的蛋白与10000条/头感染剂量不同感染时间的猪阳性血清均呈现特异性条带。制备的多克隆抗体效价为1∶350000。Ts-Sp-7多克隆抗体的间接免疫荧光鉴定结果显示,Ts-Sp-7蛋白在旋毛虫肌幼虫期存在于虫体表面。

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