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核因子κB在凝血因子Ⅶa促进结肠癌SW620细胞增殖迁移中的作用

郭东琳 周红 吴莺 周芳 张先梅 许国莹 文海平 江苏大学基础医学与医学技术学院 镇江212013 江苏大学附属医院消化内科
  • sw620细胞系
  • 结肠肿瘤
  • 蛋白酶激活受体2

摘要:目的探讨核因子KB(NF—κB)在促进结肠癌SW620细胞增殖迁移过程中的作用及其可能的机制。方法以凝血因子VIIa、NF—κB抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)等处理结肠癌细胞株SW620,采用Westernblot法检测细胞核NF—κB(p65)、细胞浆NF-κB抑制蛋白(IκB-α)和凋亡蛋白半胱氨酸蛋白酶7(caspase-7)的蛋白表达变化;采用流式细胞术检测SW620细胞的细胞周期变化;采用Transwell法测定SW620细胞的迁移能力;采用实时定量聚合酶链反应(PCR)检测白细胞介素8(IL-8)和组织因子(TF)mRNA的表达水平。结果凝血因子Ⅶa能够显著下调细胞浆中IκB-α的表达水平,并使细胞核内NF—κB的表达水平升高,单克隆抗TF和抗蛋白酶激活受体2(PAR2)抗体能够抑制凝血因子Ⅶa的这一作用。PDTC能够明显干预凝血因子Ⅶa对SW620细胞增殖、迁移的促进作用。PDTC能够明显干预凝血因子Ⅶa对SW620细胞中TF、IL-8mRNA表达的促进作用和对caspase-7蛋白表达的下调作用。结论凝血因子Ⅶa与细胞表面TF结合形成TF/Ⅶa复合物,活化受体PAR2,经NF—κB通路上调IL-8、下调caspase-7的表达,促进SW620细胞的增殖与迁移。TF/Ⅶa//PAR2/NF—κB通路还可进一步上调TF的表达,从而形成TF/Ⅶa/PAR2/NF—κB/TF正反馈通路。

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