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Toll样受体8在人宫颈癌细胞株HeLa中的表达及其激动剂对HeLa细胞增殖和凋亡的影响

杨恒 何志强 赵银霞 王楷文 郑东 苏兆亮 仝佳 马洁 王胜军 许化溪 江苏大学检验医学研究所免疫研究室 镇江212013 河南省中医院检验科
  • toll样受体8
  • 宫颈肿瘤
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  • 细胞增殖
  • 细胞凋亡

摘要:目的观察Toll样受体8(TLR8)在人宫颈癌细胞株HeLa中的表达,探讨TLR8激动剂CL075对HeLa细胞增殖和凋亡的影响。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法,检测13种肿瘤细胞系中TLR8mRNA和经CL075作用后HeLa细胞中环氧化酶2(COX-2)、Bcl-2和血管内皮生长因子(VEGF)mRNA的表达水平;采用免疫荧光技术对HeLa细胞中TLR8蛋白的表达进行定位观察;采用流式细胞术检测不同浓度CL075作用下HeLa细胞的细胞周期和凋亡的变化;采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测HeLa细胞的增殖状态。结果与其他肿瘤细胞株相比,HeLa细胞中TLR8mRNA的表达水平最高,达703.7±20.6。TLR8蛋白主要定位于HeLa细胞的胞浆中。0.1、0.5和1.0μg/ml的CL075分别作用于HeLa细胞48h后,G2/M+s期细胞所占的比例逐渐增高,其中1.0μg/mlCL075作用组G2/M+S期细胞所占的比例最高,达(57.67±1.73)%,明显高于空白对照组[(39.02±2.33)%,P〈0.01]。经不同浓度的CL075处理后,HeLa细胞的凋亡水平与空白对照组相比,无明显改变(P〉0.05);但经顺铂处理后,凋亡细胞明显增多(P〈0.01)。MTT法检测结果显示,与空白对照组比较,CL075作用于HeLa细胞48和72h后,HeLa细胞的增殖能力明显增强(P〈0.01)。CIA)75作用于宫颈癌HeLa细胞24和48h后,COX-2、Bcl-2和VEGF mRNA的表达水平明显升高(P〈0.05)。结论宫颈癌HeLa细胞中TLR8的表达水平及其与配体相互作用的信号,可能是肿瘤发生和发展的重要因素之一。TLR8可能是宫颈癌治疗的一个潜在靶点。

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