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雄激素受体干预对包皮成纤维细胞Mafb基因表达的影响

王绍; 周玥; 向涵; 刘星; 沈炼桔; 龙春兰; 张德迎; 何大维; 林涛; 魏光辉 重庆医科大学附属儿童医院泌尿外科、儿童泌尿生殖发育与组织工程重庆市重点实验室、儿童发育疾病研究教育部重点实验室、儿童发育重大疾病国家国际科技合作基地、儿科学重庆市重点实验室; 重庆400014
  • mafb
  • 双氢睾酮
  • 氟他胺
  • 成纤维细胞

摘要:目的:探讨双氢睾酮(dihydrotestosterone,DHT)与氟他胺(flutamide,Flu)对Mafb基因表达的影响。方法:利用原代培养的正常儿童包皮成纤维细胞株,分别采取不同浓度DHT与Flu干预,通过RT-PCR、免疫细胞荧光和Western blot检测Mafb的转录表达情况。结果:在DHT浓度为3.0×10^-8mol/L与3.0×10^-6mol/L干预条件下,Mafb mRNA的表达量分别为0.372±0.003、0.594±0.045,与正常组(0.444±0.007)相比,DHT 3.0×10^-6mol/L组明显上调(P=0.005),而DHT 3.0×10^-8mol/L组上调差异不明显(P=0.145);Flu 15μmol/L干预条件下,Mafb mRNA的表达量为0.221±0.013,与正常组相比,表达量明显下降(P=0.000)。细胞免疫荧光分析表明,与正常对照组相比(0.027±0.006),DHT 3.0×10^-8mol/L组(0.046±0.004)、3.0×10^-6mol/L组(0.076±0.003)Mafb表达量明显上调(P=0.010,P=0.000),而Flu组(0.006±0.002)明显下调(P=0.009)。同样Western blot结果显示,较对照组蛋白水平(0.163±0.001)相比,DHT 3.0×10^-8mol/L组(0.146±0.001)上调无统计学差异(P=0.960),DHT 3.0×10^-6mol/L组(0.598±0.087)Mafb表达量上调差异有统计学意义(P=0.000),而Flu组(0.066±0.002)明显下调(P=0.040)。结论:在体外培养包皮成纤维细胞株中,Mafb基因的表达受DHT和Flu的调控。Mafb作为雄激素受体下游调控蛋白,可能是雄激素受体信号通路促进尿道发育的重要机制。

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