医学技术论文篇(1)

1取得的主要成绩主要为以下三个方面

（1）继续医学教育在卫生人才队伍建设中有十分重要的意义

已经成为医疗卫生单位增强核心竞争力和卫生技术人员提高能力素质的主要途径，“十二五”计划提出的继续医学教育目标基本实现。本文通过调查发现有82.8％的医疗卫生单位开展继续医学教育活动，其中100％的县级及以上单位开展继续医学教育。96％被调查的卫生技术人员在2013年已经获得超过25个继续医学教育学分，100％的市及省级医疗卫生单位举办的继续医学教育项目学科（二级）。

（2）全省已经形成运转灵活、层次清晰、系统有效的继续医学教育组织管理体系

本次调查结果显示，100%的医疗卫生单位有专职人员管理继续医学教育。96%的医疗卫生单位制定了年度计划并进行工作总结，99%的医疗卫生单位制定了继续医学教育管理与实施办法，初步建立起统一领导、分工明确、协调有力的工作机制。

（3）全省通过开展内容丰富、多形式的继续医学教育活动

激发了医务人员的学习需要，建立了一个较好的学习平台。本次调查结果显示，100%的单位把继续医学教育学分作为职称晋升的条件，90%的单位把继续医学教育学分作为年度考核和执业再注册的条件，68.8%的单位把继续医学教育学分作为岗位聘任的条件，不仅能够充分调动个人和单位的积极性，还能确保继续医学教育的质量和水平。

2存在的主要问题包括以下五个方面

（1）卫生技术人员参与继续医学教育活动差异性较大

各个级别卫生技术人员的技术基础水平不同，基础技能和基础知识的水平也不同，因而需要接受的教育内容和形式也不同。

（2）医疗卫生单位继续医学教育工作发展不平衡

从不同级别医疗卫生单位来看，省市级医疗卫生单位继续医学教育工作明显好于县乡级医疗卫生单位，基层工作开展较差。

（3）继续医学教育经费投入不足

本次调查发现，55.9％的单位没有专项经费，44.1的单位有专项经费。在参与调查的卫生技术人员中，80％的人需要支付一半的学习费用，49.9％的人需要花费80％的费用，25.8％的人花费20％的费用，6.8％的人不需要花费。这说明我们应当加强对继续医学教育经费的投入。

（4）继续医学教育资源未得到有效利用，继续医学教育形式还不够丰富

本次调查结果显示，69.2％的参加形式为网络学习，18.9％为学术会议，13.6％为自学，13.2％为参加培训班，12.9％为函授，7.3％为脱产进修。由于各级医疗卫生单位的经济等条件有差异，继续医学教育的方式主要为讲课，无新意，卫生技术人员的学习情绪不够。

（5）继续医学教育认识程度不够

由于经济条件或继续医学教育活动的质量等条件不同造成基层卫生技术人一样对继续医学教育的认识程度不足。

二讨论

继续医学教育是国家实施卫生人才战略和实施“科教兴国“战略的重要途径，同时其也是组成卫生事业发展的重要部分。为了更好的提高卫生事业为人民服务的基础，山东省各级卫生行政部门都在积极发展继续医学教育事业，积极制定继续医学教育事业发展的措施和规划，不断加强对继续医学教育工作的领导，对继续医学教育事业的平衡发展进行统筹规划。通过本次调查研究，我们发现，全省范围内的各医疗单位继续医学教育工作发展不平衡，部分基层医疗单位的继续医学教育工作发展滞后。针对上述现象，我们应当建立多层次需求的继续医学教育培养模式、建立继续医学教育评价和监督机制，为医务人员建立良好的继续医学教育发展环境，不断提高全省医学继续教育的质量和效率。具体如下：

（1）建立继续学习教育评价和监督机制

随着继续医学教育的不断发展，我们应当不断修订和完善与其相关的规章制度，以便推动全省继续医学教育的发展。因此应当通过建立继续学习教育评价和监督机制来提高继续医学教育的效益和治疗，加强对继续医学教育管理人员的培训，确保继续医学教育工作能够有序的进行。同时不断完善医学教育登记、考核和评估制度，将卫生技术人员的继续医学教育完成情况和其聘任、考核、职业资格在注册、技术职务晋升等结合在一起。正确引导卫生技术人员参加继续医学教育活动，并将所学学以致用。

（2）营造良好的继续医学教育发展患者

各级单位将开展继续医学教育工作作为提高自身实力的重要措施，为卫生技术人员创造良好的环境和条件，使其认识到只有接受教育才能执业终生，激发其学习的主动性。

（3）建立多层次需求的继续医学教育培养形式

继续医学教育工作的重点是坚持以人为本，将终身教育作为其发展的宗旨，不断对继续医学教育的内容、机制和教学方法进行改革，并结合各级卫生技术人员的自身条件，开展有针对性的继续医学教学。根据卫生技术人员的知识层面和所在单位的条件，不断提高医护人员的自身素质。同时针对基层卫生机构，请专家到基层进行授课，进行面对面的教学，采用座谈的方式，使大家的知识相互补充提高。并将互联网授课广泛应用其中，使各级学员能够简单便捷的学习。

（4）多渠道筹措继续医学教育经费

医学技术论文篇(2)

1.1人才培养目标

在内科学课程设计时要明确高职医学影像技术专业人才培养目标：为基层医疗卫生系统培养紧缺人才。经过3年时间，使学生成为适应基层医疗卫生事业改革，掌握医学影像技术基本理论及技能，能从事放射诊断、超声诊断等工作的高素质应用型人才。

1.2应具备的能力

掌握基础医学、临床医学基本理论知识和临床技能等；熟练掌握常见病的放射诊断、超声诊断基本知识、理论，具备从事医学影像诊断临床工作的能力；具备正确的思维方式和综合运用相关知识分析解决临床问题、做出正确影像诊断的能力。

1.3主干学科、主要课程

该专业主干学科包括基础医学、临床医学、医学影像学。主要课程包括内科学等。

2高职医学影像技术专业内科学理论教学课程设计

2.1突出高职医学影像技术专业特色及就业岗位需要的知识

高职医学影像技术专业学生文化基础较薄弱，对学习公共课、专业基础课、综合素质类课程兴趣不高。因此，内科学课程设计不能模仿和照搬本科课程，也不能把中专的课程简单地组合起来。高职医学影像技术专业人才培养模式必须进行相应改革，才能适应社会，尤其是基层医疗单位对人才的需求。通过适当精简、融合、重组、增设等，打破原有课程设计界限，优化课程和教学内容体系；突出职业能力培养与岗位技能训练，以突出操作能力、注重临床教学、加强技能实践、适应基层需要为原则，设置医学影像技术专业内科学课程体系。近年来我们按照这个思路，以“实际、实用、实践、实效”为原则，在制订内科学教学计划时重点选择必须具备的基本理论知识和技能，以常见病、多发病为重点，以增强动手和分析解决实际问题能力为核心，体现岗位需要的知识。

2.2明确内科学的重要性，激发学生学习兴趣

2.2.1明确内科学的地位

开始授课前向学生介绍内科学与专业课程、临床工作的关系，以激发学生的学习兴趣。让学生明白内科学在临床医学中占有极其重要的地位，是临床各科的基础学科，所阐述的内容在临床医学的理论和实践中具有普遍意义，是学习和掌握其他临床学科知识的重要基础。其涉及呼吸、循环、消化、泌尿、造血等系统的常见病以及理化因素所致的疾病，与外科学并称为临床医学的两大支柱学科。

2.2.2明确内科学学习的意义

内科学的教学任务和目的是：通过教学使学生掌握内科常见病、多发病的病因、发病机制、临床表现、诊断要点和防治措施，为日后学习其他临床学科和从事临床实践或基础研究工作奠定坚实基础。内科学是其他临床学科的基础，亦有医学之母之称。内科学是临床医学的核心学科，临床医学的共性诊断与治疗思想集中表达在内科学中；且在临床实践中，内科疾病也最为常见，其涉及面广，整体性强，既有自身的理论体系，又与基础医学密切相关，其诊疗原则与方法亦适用于其他临床各科。

2.2.3明确内科学的学习方法

内科学的学习方法是通过病史询问或面谈后，进行体格检查，根据病史与检查所见做实验室检查与影像学检查，以期在众多鉴别诊断中排除可能性较低者，获得最有可能的诊断，给出合理治疗方案。

2.3改革教学方法和教学手段，提高学生学习积极性

2.3.1重视“三基”教学，强化教学与临床实践的关系

“三基”即基础理论、基本知识、基本技能。内科学学习以疾病为中心进行讲解，包括病因、发病机制、病理解剖、生理变化、临床表现、影像学诊断方法和防治措施等。如学习“慢性支气管炎”时，先让学生复习支气管的解剖和生理特点，炎症的病理特点，咳嗽、咳痰的临床特点及影像学特点，再进行讨论并提出诊断依据，给予合理治疗，从而达到基本理念与临床知识的有机结合，为形成正确的临床思维奠定基础。

2.3.2重视疾病间影像诊断的鉴别

影像诊断的主要依据是图像，通过对图像的观察、分析、归纳和总结作出诊断。内科学课堂教学注重启发式和讨论式教学，采取多种教学方式，以培养学生主动学习、分析问题的能力。如肺炎链球菌肺炎、肺结核病早期，病变部位病理改变为渗出性炎症，影像学检查表现为相似的X线征象，但这两种疾病的典型临床表现不一样，如发热症状，肺炎链球菌肺炎多呈稽留热，肺结核病人多表现为长期低热，于午后或傍晚开始，次日晨降至正常。通过对这两种疾病的介绍，引导学生明确学习内科学的重要性和意义，使学生明确影像学检查只是辅助检查，必须结合临床表现进行分析才能得出合理的影像诊断，从而为临床医生明确诊断提供依据。

2.3.3利用多媒体教学设备进行教学，增强直观性

充分利用多媒体等教学手段进行教学，增强直观性，加深学生感性认识，激发学生的学习兴趣。在教学中为了增加对学生的感官刺激，弥补临床见习中的不足，通过多媒体展示临床病例后再进行教学。如讲授“慢性支气管炎”“肺心病”时，先以病案形式展示实例，激发学生的求知欲，使其积极参与到教学中。教学中还可通过对解剖、病理生理知识的复习来阐述疾病的演变和表现、两种病之间的联系、影像诊断的变化，组织学生进行讨论，提出诊治方案，不仅使学生产生成就感，而且提高了其分析、探索问题能力，从而收到良好的教学效果。

2.3.4强调教学总结和复习

教学中对一堂课的内容加以归纳、总结和复习，使学生明确重点，从而达到巩固知识、加深理解的目的。课堂导入和结束的方法多种多样，只要能提高教学效果的方法就是好方法。如教师对“肺结核”一病讲授完理论知识后，就要引导学生进行总结，明确“肺结核”临床分5型，每型的影像特征不同。

2.3.5改革考核方法，评价学生综合能力

重视课间学习，培养学生理论联系实际意识，从而提升学生操作技能。改革考核方法，评价学生的综合能力，如通过病例分析引导学生注重理论知识与临床实践相结合，明确岗位需求、就业要求，为培养应用型人才奠定基础。

3加强教师实践能力和综合能力培养

教师的能力评价对教师的业务发展具有导向作用。高职院校只有一部分教师有深入生产第一线实践的经历，大部分教师缺乏动手能力，不能将医院最新技术引入教学之中。随着经济的发展和社会的进步，高职“双师型”教师已成为主要的师资力量。教师应定期深入临床，熟练掌握临床技能，了解相关的政策、法律法规，了解社区医疗、农村卫生室岗位需求；认真备好、写好教案，全面推进素质教育，为培养具有较强实践能力的医学人才贡献力量。

4选好教材

医学技术论文篇(3)

（一）教学目标定位不准，学习内容纷杂、主线不清

非计算机专业网络技术教学存在照搬计算机专业教学程式，忽视专业特点的现象。教材一味择权威、“高大全”，内容覆盖广，重、难点多，专业术语繁杂、抽象。教学目标制定盲目攀高，面向理论，缺少实践内容等问题。网络技术是一门交叉学科，涵盖、涉及的知识面广。若无选择、无着重点、无针对性，忽略教学目标与今后职业应用的关系，会造成学生望而却步，产生厌学情绪。更有甚者，许多内容未必用得到，势必造成教学内容丰富，学生所获实用知识甚少的尴尬局面。偏离了“着眼应用重视需求”这条教学目标主线。

（二）理论与实践脱节，实验拘于步骤

教学过程存在理论与实验分离的现象。单纯的理论传授使学生无感性认识，实验操作时无所适从。以教师为主导，学生被动接受知识的教学模式抑制了学生的自主潜能，削弱了学习兴趣。实验内容单调、重视步骤，缺乏理论与实验衔接，缺少实验内容与实际应用结合。理论与实验的分离遏制了网络技术教学的发展，严重影响了教学质量。拘泥于步骤的实验方法束缚了学生的主观能动性，有悖于“学生为中心”、“问题为中心”等先进的教学理念，不利于学生应用能力和科学思维能力的培养。

二、医学信管专业网络技术应用能力的培养

在缺少本专业教学模式、经验借鉴的情况下，针对教学中存在的问题及现状，几年来，经过反复摸索、改革、实践，在教学方式和方法上，针对信管专业教学得到了一些经验。

（一）教学目标主线定位明确

教学目标的定位要紧密结合专业培养目标，以提高专业技术的应用能力为教学目的，以专业需求为依据，强调实用性，实效性。重视应用能力的培养，有的放矢、学以致用。教学目标确定基于教学目的，教学目标定位应考虑学生未来职场应用的需要，考虑所学内容能否充分运用到实际工作中。结合办学条件、性质、教授对象，认真分析、实践、总结，从章节到总体构成进行综合科学评价，得出符合自己专业的教学内容体系。内容体系要随信息化进程同步革新，这是个不断总结、研究、调整、实践、再总结周而往复的渐进过程。

（二）教学要突出应用，内容明晰

教学目标的准确定位是确保教学效果最优化的基础，把握内容组成结构是决定教学基本内涵的重要环节，不能机械式照搬，更不能盲目模仿。网络技术由原理及应用两部分组成，前者侧重理论基础，后者是基于理论的设计、配置、开发应用等实践性内容。针对本专业特点，紧密结合应用需求，遵循确定的教学目标，充分对知识体系进行全面分析、认真设计，研究制定出课程的内容体系和教学方法。排除轻视应用，注重理论，或迷信应用，忽视理论的现象。理论、实验相辅相成，互为支撑，合理组织理论及实验内容，不能偏废。从实际应用需求着手，使学生既具备一定的理论素养，又拥有较强的网络技术应用能力。围绕教学目标组织教学内容。依据内容体系结构，优化、精练教学内容，合理分配，科学取舍。制定出适合本专业教学目标，注重理论、实践密切结合的教学内容纲要。

（三）以应用为目的，培养科学思维，改革教学方法及教学手段

改革教学方法，摒弃教条、照搬书本的陈旧教学模式。探索适合本专业学生接受能力、科学思维的教学手段。以启发、引导、师生互动为主要途径，采用适宜本课程教学的“问题为中心”、“任务驱动”等广为推崇的教学方法，达到理想的教学效果。

1．理论与实验交叉教学，解决理论、实践脱节问题。

网络技术理论、实验密不可分，两者平行且交融。理论是实验的基础，实验是加深对理论认识、应用的有效途径，是理论联系实际、培养、提高动手能力的重要平台。采用理论、实验交叉教学效果明显。所谓“交叉”指对某些内容理论、实验交互进行。该方法保证了理论与实验内容的有效衔接。对教学内容有目的、条理化组织，将理论与实践内容合理分配。对关键原理性内容教师现场演示讲解，学生同步操作，以实验事实说明理论原理。涉及到与理论相关联的应用实时进行操作验证，在感性认知的基础上掌握理论内容，加深学生对所学知识的理解。实践表明，交叉教学方法可充分提高有关教学内容的效果。合理采用模拟实验环境，可在有限课时内达到事半功倍。如，对TCP／IP体系各层实现原理，通过包捕获软件进行有关分析，理解报文的组成及协议层间的相互关系。再如，网络设计中，在模拟环境下用多种拓扑结构实现设定功能，比较各种方法的优劣，了解网络设计优化的概念等。

2．依内容特点，引“问题为中心”教学，培养科学思维方法。

根据教学内容特点，有针对性地采用“问题为中心”的教学方法。“问题”教学优势已日渐凸显，成革除传统教学弊端的手段之一。将课程所含知识，转化为解决实际应用的问题。针对实际应用，以提出、分析、解决问题为线索，以启发、引导的方式进行教学，使学生在探索解决问题的思维活动中掌握知识，提高专业科学思维意识。围绕教学知识点，对核心内容以问题构造情境。如，介绍TCP／IP体系结构内容时，用“tcp／ip协议的各层数据包结构及其关系”提出要解决的问题，带着问题进入学习过程，继而通过对数据包分析，引导学生发现IC－MP、OSFP等协议无传输层协议包，产生“为什么”的疑问。教师分析归纳、实验演示，学生同步操作，清楚了类似协议在网络层结束向上传输的缘由。明白了层间包结构的关系及构成。创设问题情境，学生参与其中，体现了学生的重要地位。对问题的处理，增加了学生的问题意识，激发了学习潜能，培养了学习兴趣。通过归纳分析，总结规律，培养了学生对网络技术的科学思维方法。

3．以“任务驱动法”营造应用情境，激发学习主动性。

对设计类型实验采用“任务驱动”教学法。以任务为主线，学生为主角，教师设计出体验实践的任务情境。如，基于实验总体目标，将内容划分成典型的单元“任务”，核心内容融入具体的案例和任务中，通过对“任务”的执行完成预定目标。该方法利于培养学生分析、解决问题及彼此协作的能力。改变了传统实验单调、注重步骤的弊端，创建了以学施教、学生主动参与、自主协作的新型教学模式。以局域网设计为例，教师结合综合案例，模拟企业级局域网作为基础项目，按逻辑划为单元任务。诸如，Ip子网、vlan设计；静态路由、动态路由区域设计；访问控制，基于网络层、传输层区域流量及安全限制；边界路由的NAT转换；汇聚设备上的DHCP配置等任务。学生围绕与现实情况类似的单元任务，以角色身份带着真实的“任务”进入完全情景化的虚拟环境。“身临其境”增加了任务感，通过分析解决面临的问题，加深了对网络设计过程的了解，开阔了视野，强化网络技术的应用技能。在完成“任务”的过程中，教师提供解决问题的线索，将网络系统设计思想融入实验中，营造讨论、交流合作的氛围。学生面对实际应用案例，积极、主动地应用所学知识分析、解决实际问题，采用自己认为最佳的途径得出解决问题的方法。单元“任务”的完成，更能激发学生的求知欲，形成感知心智活动的良性循环。随着各个单元任务的完成，伴随接踵而来的成就感，更加提高了学习兴趣。最后，回首完成的所有任务，相当于一个较全面的网络设计项目，这时的成功喜悦是不言而喻的，这将大大增强学生的学习自信心。“任务驱动”为学生思考、探索、发现和创新提供了开放的空间，培养了学生分析问题、解决问题、相互协作的能力，开拓了主动创新的意识，培养了科学思维的良好习惯。

4．采用模拟仿真教学，增强实践应用能力。

针对网络设备相对短缺，硬件网络实验环境效率低下，学生缺少实践机会的状况，对部分实验采用模拟软件仿真教学方法。由于其对物理环境模拟的真实性，具有仿真程度高，使用过程方便，交互性好，对硬件要求低等优点，成为网络实验的重要手段。极大地促进了教学方法的优化，充分提高了网络技术教学的效果和效率。在应用模拟环境的教学中，可即时模拟演示应用操作内容，学生同步进行实践，达到即学即用的效果。有机地将理论与实践统一起来。教学实践表明，这种教学方式效率高，节省开支，有较好的教学效果。模拟仿真方法打破了传统教学模式，开创了课堂教学的新形式，解决了传统教学模式下理论、实验难以交叉进行教学的难题。网络模拟仿真环境可以实现具有一定规模的真实网络环境，在此平台进行实验，可以满足大多数的实验需求。在网络设计实验中，它克服了网络物理环境下拓扑不易改动，实验用时过长、不够灵活等诸多缺点，大大提高了网络实验效率。在课时有限的情况下，可以达到事半功倍的效果。仿真模拟环境增强了学生应用动手能力，为学生进行网络实践，培养专业应用技能提供了良好的条件。仿真模拟教学方式，充分发挥了教师的主观能动性，积极探索实验教学新方法。力求营造出高效、良好的教学实验环境。结合“任务驱动”、“问题为中心”的教学方法，使实验教学内容更加丰富、充实。由于模拟软件的易操作性、便利性，不受时间、空间的限制，使学生在课外进行实践成为可能。有效开展课外教学实践，设定课外实训项目，增强学生对网络技术的实际操作能力。通过模拟教学，我们对“教学环境职业化、教学环节情景化、教学手段现代化”的教学理念有了更进一步的理解。

三、结语

医学技术论文篇(4)

想挑战超人类主义所提出的概念,此概念试图补全那件仍只是半成品的人类改造工程。作为回应,笔者简单概括了一下《赫西奥德和埃斯库罗斯》中关于普罗米修斯神话的两种解释,它可以帮助我们正确地了解运动医学的道德局限。以此总结为一条平淡无奇的提示:人类是凡胎俗骨的,面对疾病和死亡的脆弱无助是远非人类自身可以克服或消除的,这代表了在道德以及普通医学,特别是运动医学这两方面的自然局限。

二、生物医学技术与体育科学的发展

把现代社会实践归结为科学问题很容易,同样,设想一种特定的科学技术,例如电脑技术来举个范例也不难。将技术与工具制造联系在一起,使我们又开始怀念起那些被闲置的工具。“技术”一词有一个古老的过去,它来源于两个希腊字技艺和徽标。技艺是指那种技巧——“实用知识”参与决策的事情,而通过标识恐怕只是推理的一种形式,旨在了解其性质或从事物中得到我们所认可的东西,它实际上是由亚里士多德创造出来的,“技术”的意义最初指修辞学的技术技能——标志字面上的技艺。但是,在日常生活中把科学和技术的概念混为一谈的做法并不少见。事实上,至少在英国,体育科学家就经常把他们的研究活动和本来该称作体育技术的事物混为一谈。目前,哲学领域的科学家早就明确区分了理论(科学)和应用(技术),但这一区分并没应用到在对体育的自然研究中。在日常交谈中,把科学和技术这两个概念区分开来是比较困难的。事实上,体育科学家经常把他们的体育项目和确切的应该称为“运动技术”的概念混为一谈。当今的科学哲学家已经可以把理论学(即科学)和应用学(即技术)明确区分开来了,尽管在体育运动的理论科学领域,这两个概念依旧难以区分。在此可以想象一下,如果医药领域和体育科技可以很简单的获得运用,通过理论知识到实践性知识再到设备与材料的步骤,分别得出医药和体育的目的。如果以上都可以获得实现的话,那么他们的显着特征就应该是一个“目的--结果”的结构。科技就可以被认为是利用目的去得到一个被选择好的结果。

医学技术论文篇(5)

AP－PCR基本原理与常规PCR类似，均为引物指导下的DNA扩增，同样包括变性、退火、延伸的基本步骤，其不同之处在于普通PCR使用的是序列特异性引物而AP－PCR过程中的引物是10个左右非特异性寡聚核苷酸链（随机引物）。AP－PCR之所以能进行是因为在反应过程中引物和模板并不需要完全的匹配，在较低的退火温度下，只要引物的一部分特别是3′端有3～4个以上碱基与模板（DNA或RNA反转录的cDNA）互补复性且方向正确，距离在一定长度范围内，在TaqDNA聚合酶的作用下就可扩增出一定长度的DN段，利用多个随机引物可使检测区域扩大至整个基因组（Babu等，2014）。扩增后的产物经琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶电泳分离，核酸染料或放射性自显影得到DNA指纹图谱，从而分析比较其多态性或进一步克隆分析（Babu等，2014）。

2、AP－PCR的技术方法和优缺点

2．1模板DNA提取和质量检测

模板DNA提取的方法有很多，应根据组织的不同和试验需要确定，但其基本的原理相同，都是通过酶或有机试剂裂解组织使核酸游离出来，然后通过有机溶剂或吸附柱纯化后提取。核酸的浓度和质量可通过UV分光光度计读取D260nm与D280nm的比值和1％琼脂糖凝胶电泳等检测来确定（Mohini等，2011）。目前已有很多商品化的核酸提取试剂盒可供选择，使用方便并可得到较高质量的模板（DNA或cDNA）。

2．2随机引物的选择

随机引物长度通常为10个碱基，GC的含量为60％～80％的寡聚核苷酸链，随机引物不仅核苷酸的排列顺序是随机的，而且所有引物的序列无直接相关性（韦莉萍，2001）。理论上，如果1条随机引物反应可产生x个独立的条带，那么a条随机引物同时参与反应就可得到xa2个条带，但多条引物同时参与反应会相应的增加结果的复杂性和不稳定性（Nandani等，2014）。随机引物虽然可用于所有物种，但并不是所有的随机引物扩增出来的结果都有意义，想要得到较为理想的结果仍需根据研究对象和研究目的进行引物的筛选和反应条件的优化，一般来说选择能产生中等复杂度的图谱的引物（Nandani等，2014）。

2．3AP－PCR扩增条件

AP－PCR也包括变性、退火、延伸的经典PCR过程。变性过程在94℃进行，一般来说预变性3～5min；退火温度在35～38℃，也可根据引物Tm值来确定，一般退火温度比引物Tm值低3～5℃；延伸温度在72℃，在此温度下Taq酶的合成效率约为2000bp／min（Kumari等，2013）。AP－PCR的试验条件、模板的质量和浓度及反应体系中Mg2＋的浓度等都可能对扩增的结果产生影响，想要得到较为理想的试验结果，反应体系的优化和试验操作的标准化是非常重要的（Mohini等，2011；Kumari等，2013；Babu等，2014）。

2．4AP－PCR的优点

AP－PCR延续了PCR的效率高、灵敏度高、样品用量少等优点，同时又兼有自身的优点：①不同种类的生物样品即可使用通用的随机引物进行基因分析（Welsh等，1991）；②可在对研究对象不了解的情况下进行基因多态性分析，从而对研究对象进行遗传分析和分类研究（Williams等，1990；Welsh等，1991）；③对于研究对象DNA样品量有限的情况也适用（Nandani等，2014）；④随机引物易获得，试验成本低，技术容易掌握，除此之外，可对AP－PCR产生的基因条带进行纯化和克隆，以便进一步分析（Ge等，2014）。

2．5AP－PCR的局限性

AP－PCR虽然具有很多独特的优势，但目前仍处于应用的探索阶段，其本身仍有局限性：①AP－PCR技术通常是对显性基因标记进行分析，这就意味着不能将纯合子与杂合子区别开（Babu等，2014）；②由于无明确的目的序列，如果发生扩增条带的缺失就无法得知是什么原因导致的，不利于对扩增结果的分析（Kumari等，2013）；③AP－PCR的结果分析需要专业的带谱分析知识，否则很难从结果中得到有意义的信息；④AP－PCR结果的重复性问题一直是限制其广泛应用的主要原因，由于其结果受DNA模板的质量、反应体系成分和反应条件的变化等因素的影响，其扩增产物的稳定性难以控制（Mohini等，2011）；⑤AP－PCR结果通过凝胶电泳来观察，但迁移率相同的谱带的核苷酸同源型不明等情形易造成干扰，有时电泳迁移率相同的片段并非同源，这就给结果分析带来很多不确定性（Nandani等，2014）。

3、AP－PCR技术研究进展

3．1AP－PCR技术自身的优化

近年来，不断有研究者对AP－PCR技术进行改进和优化，使其更具可操作性、实用性和更广泛的应用领域。刘刚等（2004）对AP－PCR进行了优化，建立了多重随机引物PCR（M－RAPD）技术，M－RAPD通过使用3条组合的随机引物在较高的退火温度下对肺炎链球菌、粪肠球菌和大肠埃希菌耐药菌株等的染色体DNA进行扩增获得了稳定的种株特异性的DNA指纹图，其所提供的基因信息要远多于传统的RAPD技术。Xiong等（2012）对AP－PCR进行了反应程序优化和随机引物中G／（G＋C）不同比例研究，结果表明，反应程序中从退火步骤到延伸步骤的时间延长，温度变化由3℃／s下降到0．3℃／s时，PCR产物条带明显增加，这可能是由于延长温度变化的时间可提高引物与模板结合的稳定性（Fu等，2000），在比较了随机引物中G／（G＋C）不同比例的PCR产物后发现，当G／（G＋C）比例在0．7时PCR产物的条带最多，也更适用于进行AP－PCR反应，因此反应程序的温度变化和随机引物中G／（G＋C）的比例可能也是影响AP－PCR结果的重要因素。Zou等（2003）报道了利用两步AP－PCR方法在微量DNA样品中扩增未知序列DNA并进行克隆。第1步PCR利用29个核苷酸序列的引物进行扩增，Ran5－29（5′－GTTCTACACGAGTCACTGCA－GNNNNNNNTGGC－3′），这一随机引物包括21个已知核苷酸序列部分，7个随机核苷酸序列和1个3′端TGGC的卡子结构，在随机序列前6个核苷酸序列构成了1个PstⅠ位点，其中3′端卡子结构在退火时可与含有GCCA位点结合，保证了随机序列可与GCCA上游的序列匹配，3′端TGGC的卡子结构可使引物与模板的匹配数增加7～11个核苷酸，PstⅠ位点决定PCR产物的长度，并保留1个黏性末端，保证了克隆的顺利进行。第2步PCR使用可与Ran5－29相匹配的19个核苷酸的Fix5－29（5′－GTTCTACACGAGTCACTGC－3′）作为引物，获得的产物进行纯化、克隆分析。结果表明这种策略可检测临床样本DNA的最小量在1pg，克隆灵敏度达到100fg目的DNA模板。这种方法较普通AP－PCR灵敏度更高，适用于样本量极少的临床样品检测。Clem等（2007）在对比了AP－PCR方法的不同扩增策略，在此基础上建立一种快速有效的检测不明病原的多重随机RT－PCR方法。在对血液样本进行过滤后加入了DNase和RNase消化，利用宿主基因对DNase和RNase敏感而衣壳保护的病毒对其不敏感的特点，去除宿主自身基因的污染。其利用单一十聚核苷酸为引物，引物序列为（V8A2）5′－VVVVVVVVAA－3′，V＝A、G或C，3′2个A提供了一个“lock”结构，引物中不含有胸腺嘧啶脱氧核苷酸（T）可避免发生引物二聚体，但这一结构不可避免的会影响引物与模板的结合。试验结果一旦监测到病毒的扩增产物即可通过鸟枪法克隆测序鉴定。这一方法对病毒的出现或重组进行快速监测和鉴定有很强的实用性，其检测灵敏度达到1000克隆／mL，应用这一技术成功从血液样品中检测并获得了3种独立病毒的部分序列。

3．2以AP－PCR为基础衍生的分子生物学技术

随着分子生物学技术的发展，单一的AP－PCR技术已不能满足研究的需要，因此为了克服AP－PCR的一些缺点在其基础上衍生出包括非序列依赖单引物PCR（SISPA）、简并核苷酸引物PCR（DOP－PCR）、DNA扩增指纹印记（DAF）、微卫星引物PCR（MP－PCR）等分子生物学技术。SISPA方法最早是由Reyes等（1991）建立起来的，其以AP－PCR为基础，非对称的单一引物与DNA模板的钝末端直接连接，随后经过若干循环的变性、退火和延伸后，模板的数量得到扩增，后经克隆、测序、分析得到基因序列。Breitbart等（2005）在SISPA的基础上建立了DNase－SISPA联用的方法，增加了样品过滤和DNA酶消化等步骤，成功的从人的血液临床样品中发现了新的病毒基因。Djikeng等（2008）在已有研究基础上进行了新的改进，在样品的处理中加入RNase酶以清除外源RNA的污染如核糖体RNAs。针对有polyA尾的病毒，在反转录过程中加入六聚核苷酸随机引物5′端加入一段病毒特异性引物序列，形成结合引物（FR26RV－N：5′－GCCGGAGCTCTGCAGATATC－NNNNNN－3′），同时加入连接polyT的引物（FR40RV－T：5′－GCCGGAGCTCTGCAGATATC－TTTTTTTTTTTTTTTTTTTT－3′）以增加对病毒基因3′端的覆盖率。这种在六聚体随机引物连接一保守序列即病毒特异性引物，可增加对病毒基因5′的捕获，从而使SISPA的成功率大大提高。DOP－PCR技术是在AP－PCR基础上建立起来，其引物（DOP－ORI－Xho）由22个核苷酸组成，3′和5′端的特异核苷酸序列和中间的6个核苷酸构成的随机引物组成（Telenius等，1992）。由于随机引物的简并性，每个反应包含着数以千对的引物。DOP－PCR的反应程序包含2个不同的部分，前5个循环引物的3′端至少有12个连续的核苷酸与模板DNA相结合，对引物和模板的匹配度要求不高，在随后的30～40个循环里，扩增错配的几率会逐渐降低。初始反应产物将成为模板，用相同的引物进行扩增，扩增产物通过克隆测序即可获得基因序列（韩焘等，2013）。Csaba等（2002）打破了DOP－PCR只用同一种引物的传统，尝试了5条新的可用于反应的引物，使反应时间由原来的7～8h缩短为2h，缩短了变性过程的时间，在取得理想结果的同时，减少了扩增酶的用量，提高了DOP－PCR的效率和实用性。DAF是一种改进的AP－PCR分析技术，与AP－PCR技术不同的是，DAF使用的引物浓度更高，长度更短（约5～8个碱基），在PCR反应上只包含2个温度的循环，省去了延伸的步骤，使用聚丙烯酰胺凝胶电泳，通过银染方法观察结果。DAF通常会产生非常复杂的带型，因此它所提供的谱带信息也比AP－PCR大得多（Caetano－Anolles等，1993）。Al－hag等（2007）应用DAF鉴定8株细胞系，研究结果表明，DAF可产生稳定的可供区分的PCR谱带。Ehsan等（2011）应用DAF技术对分离到的25株牛隐孢子虫进行亚型的鉴定，结果发现分离的25个虫株分属于为3个不同的亚型。MP－PCR是以AP－PCR为基础的分子标记技术。Ma等（1996）发现真核生物基因组中存在短串联重复序列，又称微卫星DNA或简单重复序列（simplesequencerepeats，SSR）。真核生物基因组中SSR的分布是随机的，大约每隔10～50kb就有1个SSR。SSR位点最常见是双核苷酸重复，即（CA）n和（TG）n，每个微卫星DNA的核心序列结构相同，重复单位数目10～60个。MP－PCR的引物是与SSR位点互补的二聚或三聚核苷酸重复序列，如其引物序列可是（TA）10或（CGA）6，扩增的是SSR之间不同长度的DNA序列，将扩增产物进行凝胶电泳，根据分离片段的大小决定基因型并计算等位基因频率（Dawson等，2013）。MP－PCR克服了AP－PCR引物的不确定性，增加了PCR产物谱带的稳定性和针对性，该技术也已广泛应用于物种分子标记、基因图谱绘制和基因差异性分析等方面（Tian等，2014；Ding等，2014；Wei等，2014）。

3．3AP－PCR与其他分子生物学技术的联用

扩增片段长度多态性（AFLP）技术是将基因组DNA先用限制性内切酶切割，然后将双链接头连接到DN段的末端，接头序列和相邻的限制性位点序列，作为引物结合位点（Rikalainen，2013）。针对AP－PCR结果谱带核苷酸同源性无法确定的缺点，Tan等（2011）将AP－PCR与AFLP进行联用，利用2种方法各自的优势，在对可能含有未知病原的临床样品进行检测，以实验室确诊的登革1型病毒为阳性对照，首先用AP－PCR对有限的样品基因进行随机扩增，然后使用AFLP技术对进行扩增从而得到样品稳定的DNA多态性标记。此方法克服了AP－PCR的同源性不明问题，同时比单独使用的AFLP方法进行检测的灵敏度提高100倍，在临床样品的检测中有很大的实用价值。高通量的测序技术也被称为下一代的测序技术，其与AP－PCR技术的配合使用，让AP－PCR有了更广阔的应用前景。Hang等（2012）首先使用锚定随机引物P17N8（5′－GTTTCCCAGTAGGTCT－CNNNNNNNN－3′）进行RNA反转录，在通过锚定随机引物P17N8和P21（5′－CGCCGTTTCCCAG－TAGGTCTC－3′）同时进行AP－PCR扩增，再通过高通量的测序技术对PCR产物进行测序，对得到的基因序列进行拼接处理，从而得到了奥罗普切病毒和卡拉帕鲁病毒L片段完整基因序列。vanderHeij－den等（2012）利用序列非依赖性病毒基因片段扩增方法与Roche－454测序技术联用，成功的从患急性肝炎病犬的肝脏组织检测出犬Ⅰ型腺病毒基因，研究结果表明AP－PCR技术和下一代的测序技术联合使用的方法在获得病毒完整基因序列和检测病原等方面的实用性。

4、AP－PCR技术在动物医学中的应用

4．1在传染病流行病学和病原遗传学分类中的应用AP－PCR由于其独特的技术优势，在兽医传染病学和病原遗传学分类中已得到广泛应用。Leh－marn等（1992）用此技术对念珠菌属的分离菌进行分析，试验结果表明，同一菌种的不同菌型间呈现出DNA长度的多态性；此带型图在同一菌种的不同菌型间，其相似程度远大于不同种的菌株，这也说明每种菌的随机引物PCR带型极具特征性。Louie等（1996）用2种引物检查15株李斯特单核菌相关流行分离株和36株不相关流行分离株。经扩增后的带型分析，将其分为9个型，每个型中又分有不同的亚型。Zadoks等（2000）在牛乳样品中分离到23株金黄色葡萄球菌，经AP－PCR鉴定1～8株属于Ⅰ型菌，9～20株属于Ⅱ型菌，其余3株分别属于Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ型菌。Butler等（2001）应用该技术对3次牛霉形体暴发流行菌株进行了检测，结果表明，发生在其中2个养牛场的流行病原菌具有一致的指纹图，引而具有相同的感染来源，而在另一牛场分离的菌株间则显示了指纹图谱的显著异型性，说明它们具有多个感染来源。王雪敏等（2011）利用多组随机引物对副鸡禽杆菌10个国际标准株、血清C型疫苗株和4个国内分离株进行AP－PCR扩增，结果显示，所有菌株可分为11个谱型，聚为4类。划分的11个谱型可和现有分型方法中的不同亚型一一对应，提示这种方法可区分不同血清亚型。AP－PCR作为寄生虫遗传学分类鉴定的方法已得到广泛应用，克服了传统分类方法难以解决的问题。Macph－eson等（1993）应用AP－PCR技术区分来自不同宿主的7种艾美尔球虫，结果表明选择合适的引物可对7种球虫进行鉴别。张伟信等（2003）应用该技术对鸡柔嫩艾美耳球虫不同地理株的多态性研究，结果表明不同地理株间及同一地理株亲代与子代间均存在DNA多态性差异，其中不同地理株间种内变异程度较大，同一地理株子代与亲代间也发生遗传变异，但变异程度较小。

4．2在病原差异基因分析中的应用

AP－PCR技术进行RNA指纹图谱分析不仅能鉴定基因的表达差异，而且能显示低水平表达的基因差异。Nicho－las（2000）应用此方法鉴定了丝裂霉素C诱导下鼠伤寒沙门氏菌SOS调控基因表达的差异，结果表明，丝裂霉素C诱导后21条基因谱带出现表达水平的上调，其中20个基因片段对应的是可辨识的基因序列，15个基因序列与数据库中基因序列无同源性，被确定为新的表达序列，6个基因片段与SOS基因编码的调控蛋白有关。Diana等（2005）应用AP－PCR技术对苄硝唑作用下克氏锥虫基因表达差异多态性的研究，结果发现对苄硝唑敏感和对苄硝唑抵抗种群之间系统指纹图谱存在一定的差异，其中可能存在克氏锥虫对苄硝唑拥有抗性的表达机制，虽然抗性种群在苄硝唑作用下系统指纹图谱没有明显的变化，但敏感种群间的系统指纹图谱却有着明显的变化。AP－PCR技术为鉴定基因差异提供了一种快速有效的方法。

4．3在未知病原检测中的应用

病原微生物引起的动物疫病呈现出复杂性和非典型性等特征，普通的临床诊断方法很难确定病原的种类，这种情况下使用传统PCR方法检测临床样品的效率不高，而且存在漏检可能。AP－PCR技术提供了一个更为全面、快速和灵活的检测方法，对病原微生物进行全基因组的检测（姚四新等，2010）。Djikeng等（2008）使用DNase－SISPA技术在牛的血清中分离到牛鼻病毒基因。Clem等（2007）利用改进的AP－PCR方法，从血液样品中检测并获得了3种独立病毒的部分序列，即腺病毒17、卡萨奇病毒A7和呼吸道合包体病毒B。周斌等（2004）在研究鸭病毒性肝炎病毒时，发现其种毒可能受到污染，随后挑选4条随机引物对其进行反转录PCR扩增，共扩增出3条基因片段。克隆测序的结果表明，与禽腺病毒（鸡胚致死孤儿病毒）基因组部分序列同源性分别高达99．5％、99．6％和99．5％，从而确定了鸭病毒性肝炎病毒鸡胚尿囊液种毒受到禽腺病毒的污染。黄欣梅等（2011）采用DNase－SISPA对导致鸭、鹅产蛋下降的病原基因进行扩增，并在此基础上设计了1对特异性引物成功的扩增出新型鹅黄病毒JS804毒株基因。

5、小结

医学技术论文篇(6)

随着交叉学科的兴起与发展，不同学科技术的有机融合不断形成崭新的混合型技术，如化学与电学技术的结合产生了化学传感器检验技术．光学与电磁学技术的结合产生了流式分析技术，等等。为了便于介绍和了解，应将医学实验诊断技术进行合理的分类。但是，混合型新技术的出现，使得众多实验诊断技术难以按某种单技术原理进行分类。由于同一原理可建立多种不同技术。而不同的原理又可建立类似的技术，用于解决相同的问题，因此，目前实验诊断技术分类比较困难。

2实验诊断具体方法

2.1实验诊断前的准备工作

首先实验诊断技术人员必须提高自己的知识水平，不断学习，钻研专业技能，经常去医院了解医学发展动态，以便使教学与临床实践紧密结合，从而获得更多、更新的知识。其次，上课前要熟悉每个实验的目的、要求、试剂配制、用具的准备、提前预示，以掌握实验诊断的全过程和预计可能出现的问题。例如，微生物基础实验课中如果标本制作的结构不清楚、不典型、染色模糊、有人工假象，那么学生观察起来则很吃力，不能独立找到所要了解和掌握的结构内容。还有在进行细菌生化鉴定方面实验时，如果没有进行预示，不知道细菌培养生长的情况如何，实验诊断中出现的问题就很难给学生解释，这就必然影响学生的实验情绪，影响实验诊断结果。因此实验诊断前的准备工作至关重要。

2.2运用实验诊断教学方案

传统的教学模式往往是教师牵着学生的鼻子走，多以“满堂灌”方式指导进行实验，故导致学生有依赖心理，不动脑思考，对实验诊断过程及结果不甚明传统的教学模式往往是教师牵着学生的鼻子走，多以“满堂灌”方式指导学生进行实验，故导致学生有依赖心理，不动脑思考，对实验诊断过程及结果不甚明了，从而使整个实验课效果不理想。近年来，我们在教学中开展了综合性实验诊断教学，即学生独立设计和完成一次实验，教师只提供必要的器材和试剂，提出实验诊断技术要求和操作事项。

2.3做好实验诊断的考核方法

以往实验成绩的考核，过分依赖报告的优劣，导致学生不注重实验过程，片面追求实验结果的正确性和实验报告的篇幅与整洁程度，严重制约了对学生综合素质的培养，导致学生对实验课的不重视，不当回事。近几年我们将实验课独立出来，成为单独的一门课后，学生普遍重视起来，提高了他们对实验的重视程度，调动了他们学习的积极性，保证了成绩评定的客观和公正、提高了实验的教学效果。

3展望

发展基于需求。随着人们对疾病防治及保健概念的转变，医学实验诊断技术也必然向着相应的方向发展。同时由于相关技术的不断突破，必然促使医学实验诊断技术的加速发展。在未来的几十年内，医学实验诊断技术将会达到：①个性化和自主化为主的家庭或个人健康侦监。为达到此目的，将促使两类产品的出现：家用简便型检验仪器和即用型检测试剂材料。前者的形式可能是多探头、多功能衣帽、床、柜，甚至镜子、拐杖、手表等，后者的形式则可能是笔、纸、滴瓶、塑料卡片等。此类产品使人们可以自主检查、了解自身的某些生理或生化指标；②医院以综合生理功能监测室和组合指标化学分析室的模式服务患者。只要人进入综合功能监测室，受检后即可得出形态学检查结果。再由化学组合指标检测进行印证，最终得到确诊，即医院的实验诊断技术主要用于完成疾病的明确诊断。家庭或个人所需的实验诊断技术主要用于完成对健康指标、疾病状况的跟踪和疗效评价。

医学技术论文篇(7)

一、认真抓好专业技术人员技能培养教育和考核

专业技术人员基础理论和基本技能的高低和熟练程度是医院水平的体现，医务部、护理部及各临床医技科室要认真抓好日常技能培养，并且于每年6月和12月底分别组织开展全院性技能考核评比，医院对优秀个人和科室给予一定奖励，同时将考核成绩纳入科室年终优秀评比条件之一。

二、加强继续医学教育管理

根据《四川省继续教育条例》和《四川省继续医学教育管理办法》等规定，继续医学教育是所有医、技、护理人员学校毕业后学习新知识、新理论、新技术、新方法的必要途径，继续医学教育学分是所有医、技、护理人员职称考试、聘任，执业资格考试、注册，年度考核等的必备条件。

1、医院定期不定期组织本院专家或外出进修学习、短期培训回院的专业技术人员进行学术讲座。主要介绍新技术的临床应用，新检查、新诊断、新治疗以及疑难危重病案讨论等，原则上每月组织一次。

2、临床医技科室应定期不定期组织本科人员进行学术小讲课，新技术、新方法讨论以及疑难危重病例讨论等，每月不得少于一次。

3、根据需要定期不定期邀请外地专家、教授来院讲学。

4、鼓励专业技术人员积极总结临床经验、推广使用新技术、新理论、新知识、新方法，并撰写论文，但所有对外交流发表的学术论文必须经医务部、护理部审核签字并交科教科登记、盖章后方能交流发表，交流发表后持刊物原件再次到科教科登记。否则不报销发表费用，不评选优秀论文以及计算继续教育学分。

5、所有医、技、护理人员每年必须要有继续医学教育学分25分，且初级职称每年必须至少要有I类学分5分；中级职称每年必须至少要有I类学分10分；高级职称每年必须至少要有I类学分15分。

6、无论是全院性或是科室学术讲座、讨论医技小讲课等均应有记录、参加人员签字、教案等备查。

三、严格外出培训进修学习监督管理

1、医务部、护理部及科教科应严格审核监督管理外出进修学习、培训及学术论文交流、发表。结合医学科学发展和医院实际情况，合理安排专业技术人员进修学习、培训及学术技术交流等，努力培养医疗护理高新技术人才和实用型人才。

2、外出参加学术论文交流、专委会会议、短期培训，原则上一年内不得重复参加，外出进修学习原则上三年内不得重复参加，若因病、因事临时不能参加者，未经院领导同意不得随意转让参会资格。

3、凡外出参加学术论文交流、专委会会议、参观学习短期培训学习结束后，由参加者持院领导审批同意书、到财务科填报差旅费审批单，经院领导审批报销差旅费。

凡外出进修学习、短期培训超过一月，脱产、半脱产“专业证书”学习以及读研者学习期间生活费领发、路途车费报销按财政部门及医院有关规定进行。

财务科在审核填报差旅费前务必认真审核是否有领导审批及医务部、护理部及科教科审核签字。凡不按规定程序外出者，医院不报销任何费用，并按旷工等有关规定追究不假外出责任。

4、凡外出进修学习、短期培训、专业证书学习及读研者不遵守进修学习医院或主办单位规章制度，无故终止学习或被退回单位者，其进修学习费用概由本人负责。情节严重者医院将追究其责任，并按有关规定处理。